🧪 SN/T 1751.2-2007 · 进出口动物源食品中喹诺酮类药物残留检测

液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）— 外标法定量
📌 适用范围： 动物肌肉、内脏、水产品、奶等动物源食品中 16种喹诺酮类药物（萘啶酸、噁喹酸、氟甲喹、诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、二氟沙星、麻保沙星、培氟沙星、司帕沙星、奥比沙星）残留量的测定。
🎯 定量方式： 外标法 定量。
📊 方法性能： 测定低限 10.0 μg/kg，回收率 70% ~ 120%（视基质和浓度而定）。
📦 样品制备
取代表性样品可食部分约 500 g
组织切碎机充分捣碎均匀
密封，-18 °C 以下冷冻存放
⚖️ 称样
称取均质试样 5.0 g（精确至 0.01 g）
置于 50 mL 聚丙烯离心管中
🧪 提取（酸性乙腈超声）
加入 15 mL 1% 乙酸的乙腈溶液（5.7）
15 °C 以下 超声提取 5 min
3500 r/min 离心 5 min（15 °C 以下）
收集上清液，残渣重复提取一次，合并上清液
🧹 第一次脱脂（正己烷）
合并提取液中加入 15 mL 正己烷
混合 1 min
3500 r/min 离心 5 min（15 °C 以下）
弃去正己烷层（上层）
🌡️ 旋转蒸发浓缩
将乙腈层（下层）转移至 100 mL 鸡心瓶中
加入 5 mL 异丙醇（防暴沸）
45 °C 减压蒸发至近干
💧 复溶与初步定容
用 样品溶解液（0.1%甲酸乙腈+0.1%甲酸水=13+87）
分次转移残渣至 15 mL 具刻度离心管
定容至 5.0 mL
🧹 第二次脱脂（正己烷）
加入 5 mL 正己烷
混合 1 min
3500 r/min 离心 5 min（15 °C 以下）
弃去正己烷层（上层）
💉 过滤
取下层清液，过 0.45 μm 滤膜
供 LC-MS/MS 测定
📊 LC-MS/MS 分析
色谱柱：C8柱（2.1×150 mm, 5 μm）
流动相：0.1%甲酸乙腈 + 0.1%甲酸水（梯度洗脱）
质谱：ESI⁺，MRM 模式，外标法定量
✅ 结果计算与报告
外标法定量，按公式计算各药物残留量（μg/kg）
\( X = \frac{A_x \times c_s \times V}{A_s \times m} \)
保留 三位有效数字
起始/制备
前处理/仪器分析
终点/结果
注意事项
📋 关键操作要点与质量控制 ▼
🧪 前处理要点
• 提取溶剂：1% 乙酸的乙腈溶液（5.7），超声提取温度 ≤ 15 °C
• 离心温度均需控制在 15 °C 以下，防止目标物降解
• 旋转蒸发时加入 异丙醇 可防止暴沸，温度 45 °C
• 样品溶解液为 0.1%甲酸乙腈 : 0.1%甲酸水 = 13 : 87（体积比）
• 需进行两次 正己烷脱脂，第一次在提取后，第二次在定容后
📊 仪器分析要点
• 色谱柱：Inertsil C8-3（或等效柱），梯度洗脱（见表1）
• 流动相：0.1% 甲酸乙腈 + 0.1% 甲酸水，流速 300 μL/min
• 质谱：ESI⁺，MRM 模式，每个化合物监测 1 个母离子 + 2 个子离子
• 外标法定量，需使用 空白基质匹配标准曲线（5.11）以校正基质效应
⚠️ 质量控制要求
• 须进行 空白试验（不加试样）
• 回收率要求：添加浓度 10~100 μg/kg 时，回收率 70% ~ 120%
• 精密度：批内 RSD ≤ 15%，批间 RSD ≤ 15%
• 定性确证：保留时间偏差 ≤ ±2.5%，离子丰度比满足表2要求
📌 编制依据：
📖 SN/T 1751.2-2007《进出口动物源食品中喹诺酮类药物残留量检测方法 第2部分：液相色谱-质谱/质谱法》
📖 发布部门：国家认证认可监督管理委员会
📋 本标准适用于动物肌肉、内脏、水产品、奶中16种喹诺酮类药物残留量的测定
⚠️ 标准工作溶液须用 空白样品基质溶液（5.11）配制，以抵消基质效应
📊 检测结果以 μg/kg 表示，保留 3位有效数字