1. 样品制备
• 动物肌肉/肝脏/肾脏/水产品：取约 500 g 组织捣碎均匀。
• 牛奶：取约 500 g 充分混匀。
• 密封标识，-18 °C 以下冷冻保存。
2. 提取
• 称取 5 g 试样（精确至 0.01 g），置于 50 mL 聚丙烯离心管中。
• 用 0.1 mol/L Na₂EDTA-McIlvaine 缓冲液（pH 4.0） 冰水浴超声提取三次（约 20、20、10 mL）。
• 每次旋涡混合 1 min，超声 10 min，3000 r/min 离心 5 min（＜15 °C）。
• 合并上清液，定容至 50 mL，混匀，5000 r/min 离心 10 min（＜15 °C），快速滤纸过滤。
3. 净化（HLB固相萃取）
• 准确吸取 10 mL 提取液（相当于 1 g 样品），以 1 滴/秒 过 HLB 柱（60 mg, 3 mL，预先用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化）。
• 依次用 5 mL 水 和 5 mL 甲醇+水（1+19） 淋洗，弃去流出液。
• 减压抽干 5 min（2.0 kPa 以下）。
• 用 10 mL 甲醇+乙酸乙酯（1+9） 洗脱，收集洗脱液。
• 吹氮浓缩至干（＜40 °C），用 1.0 mL（LC-MS/MS）或 0.5 mL（HPLC） 甲醇+三氟乙酸水溶液（1+19）复溶，过 0.45 μm 滤膜。
4. 仪器测定
LC-MS/MS 法： C8柱（150×2.1 mm, 5 μm），甲醇+10 mmol/L 三氟乙酸梯度洗脱，流速 300 μL/min，ESI⁺ MRM 模式。
HPLC 法： C8柱（250×4.6 mm, 5 μm），甲醇+乙腈+10 mmol/L 三氟乙酸梯度洗脱，流速 1.5 mL/min，检测波长 350 nm。
5. 结果计算（外标法）
• X = (Aₓ × cₛ × V) / (Aₛ × m)
X — 样品中待测组分含量（μg/kg）
Aₓ — 测定液中待测组分的峰面积
cₛ — 标准液中待测组分的浓度（μg/L）
V — 定容体积（mL）
Aₛ — 标准液中待测组分的峰面积
m — 最终样液所代表的样品质量（g）
⚠️ 安全提示： 甲醇、乙腈、三氯甲烷等有机溶剂有毒，操作须在通风橱内进行，佩戴防护手套。